(產(chǎn)品貨號(hào)：F16576)

原理

試劑盒中將抗孕酮抗體包被于微孔板上，制備成固相抗體，酶結(jié)合物含有用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的孕酮抗原。反應(yīng)過(guò)程中，若檢測(cè)標(biāo)本含有孕酮，則與標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)固相抗體，形成固相抗體－抗原或固相抗體－標(biāo)記抗原復(fù)合物，并結(jié)合在微孔壁表面，洗去多余的標(biāo)記抗原，再加入酶底物顯色，用1N H2SO4終止酶反應(yīng)后，在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。

試劑盒組成（2-8℃保存）

準(zhǔn)備試劑與收集血樣

1. 收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20 ℃或-70 ℃）保存，避免反復(fù)凍融。
2. 實(shí)驗(yàn)各組份試劑使用前充分搖勻。
3. 洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）

檢測(cè)程序

1. 加樣：每孔依次各加入標(biāo)準(zhǔn)品，待測(cè)樣品100ul。
2. 每孔加入酶結(jié)合物50ul（空白孔除外），置37 ℃暗處反應(yīng)60分鐘。
3. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。
4. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。
5. 每孔加入100ul終止液混勻。
6. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值

結(jié)果計(jì)算與判斷

1. 以標(biāo)準(zhǔn)品50、25、10、2.5、0.5 ng/ml為橫坐標(biāo)取對(duì)數(shù)，OD值為縱坐標(biāo)，使用軟件作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 根據(jù)樣品OD值計(jì)算出相應(yīng)PROG含量。軟件可以向本公司郵件索取。

檢驗(yàn)方法的局限性

溶血、乳糜血樣本響測(cè)定結(jié)果。

試劑盒性能

            1. 靈敏度：*小的PROG檢測(cè)濃度小于0.3ng/ ml。

2. 特異性：與其他**沒有交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：變異系數(shù)均小于9.8％。

注意事項(xiàng)

            1. 以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致**度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。

            3. 板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。

            4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。

5. 本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！